核心能力二 能正确完成中药制剂的显微鉴别
一 、核 心 概 念
1.中药制剂的显微鉴别 利用显微镜来观察中药制剂中饮片的组织、细胞或内含物等特征进行鉴别的方法。显微鉴别操作简单、快速、准确。
2.解离组织制片法 利用化学试剂使组织中各细胞间的胞间质溶解而使细胞分离，以观察单个细胞的完整形态的方法。
二 、学习目标
能熟练进行中药制剂的显微鉴别，并正确判断检测结果。
三 、基本知识
中药制剂的显微鉴别适用于含饮片粉末的中药制剂，如片剂、散剂、丸剂等。对于用饮片提取物制成的制剂，如口服液、酊剂等，由于饮片原有的组织结构被破坏，故不能采用显微鉴别进行鉴别。
中药制剂的显微鉴别基本程序为处方分析→供试品预处理→显微制片→显微观察→显微测量→显微化学反应→记录，结果判断。
四 、能力训练
(一)操作用物
显微镜、刀片、镊子、研钵、酒精灯、铁三脚架、石棉网、滴瓶、试管、试管架、滴管、玻璃棒(粗 与细)、载玻片、盖玻片、量筒、铅笔、滤纸、火柴等。
(二)注意事项
(1)中药制剂的显微鉴别仅限于含饮片粉末入药的剂型。
(2)显微鉴别时，应选取药材在该制剂中易观察到的、专属性强的1~2个显微特征作为鉴 别依据，两味或两味以上药材所共有的显微特征，不能作为鉴别指标。
(3)中药制剂的原料药材包括植物药、动物药、矿物药，来源于相同药用部分的药材显微特 征具有一定的规律性，在显微鉴别时，应根据处方原料的来源，有重点地进行观察，提高鉴别的 准确性。
(4)装片时所选用的试液应根据药材粉末的特性和需要观察的显微特征来确定，并与原药 材粉末显微鉴别方法保持一致，如用甘油醋酸试液、稀甘油或其他试液装片观察淀粉粒；用水合 氯醛装片不加热观察菊糖；用水合氯醛加热透化后观察细胞组织特征。
(三)操作内容
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序号
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操作步骤
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操 作 要 点
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1
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处方分析
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根据处方组成及制备工艺，对制剂中含有的原药材粉末显微特征逐一进
行观察和比较，排除类似的、易相互干扰或因加工而消失的特征，选取该药
材在本制剂中易察见、专属性强的显微特征1~2个，作为能表明该药材存
在的依据。对于组成药味较多的复方制剂，可选择主药、贵重药、毒性药或
混乱品种重点观察
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2
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供试品预处理
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制片前，可按剂型进行预处理(表5-1),再按粉末制片法装片观察
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3
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显微制片
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进行显微鉴别时，一般先以甘油醋酸封片观察淀粉粒、菊糖等，再以水合
氯醛封片观察其他显微特征，最后加热透化或滴加其他理化试剂进行显微 观察。常用的制片方法见表5-2
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4
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显微观察
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一般需观察2～5个显微标本片，根据能否观察到某药材的专属性特征，
判断制剂中该药材是否存在。为提高显微鉴别的正确性，可与对照药材或
已准确进行品种鉴定的药材对照观察。观察时应采用“先低倍后高倍”的原 则，先在低倍镜下采用“之”字移动法，使标本片沿着一定的线路移动，以便 能检查到标本片的各个部位。方法：旋转载物台移动器，从盖玻片的左上角 开始逐渐使视野平行向右移动，到达右上角后，将视野向近侧移动2/3～3/4 个视野，再使视野由右平行向左移动，到达左端后，再如前法移动，直到整个 标本片观察完毕
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序号
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操作步骤
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操 作 要 点
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5
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显微测量
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常用量尺为目镜测微尺与载物台测微尺。目镜测微尺为放在目镜筒内的 一种标尺，是一个直径18～20 mm的圆形玻璃片，中央刻有精确等距离的 平行线刻度，常为50格或100格。目镜测微尺用于直接测量物体，但其刻 度所代表的长度依显微镜放大倍数的不同而改变，故使用前必须用载物台 测微尺来标化，以确定在使用该显微镜及其特定的物镜、目镜和镜筒长度 时，目镜测微尺每小格所代表的实际长度。载物台测微尺是一个特制的载 玻片，中央粘贴一个刻有精细尺度的圆形玻片，这些尺度通常将1 mm(或2 mm)的长度精确等分为100(或200)小格，每一小格长为10μm,用以标定目 镜测微尺。在标尺的外围有一黑环，以便能较容易找到标尺的位置。载物 台测微尺并不直接测量物体的长度，而是用以标化目镜测微尺
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6
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显微化学反应
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常需采用专属性的化学试剂和方法，以鉴别不同性质的细胞壁及其内含 物(表5-3)
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7
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记录，结果判断
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根据观察、记录的供试品显微特征与标准规定内容或与对照药材比较是 否相符，断定其真伪或是否有掺伪，以及成方制剂投料的真实性
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表5-1 部分剂型粉末制备方法
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剂 型
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供试品粉末制备
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散剂、胶囊剂
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取适量粉末(应研细),装片
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片剂
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取2～3片(包衣者除去包衣),研碎后取少量粉末，装片
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蜜丸
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将药丸切开，从切面由外至中央挑取适量或用水脱蜜后，吸取沉淀物少量， 装片
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水丸、糊丸、水蜜丸
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取数丸，置研钵中研成粉末，取适量粉末，装片
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锭剂
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取1~2锭，置研钵中研成粉末，取适量粉末，装片
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表5-2 常用的制片方法
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序号
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制 片 方 法
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操 作 要 点
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1
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粉末制片法
(供试品粉
末需过四号 或五号筛)
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粉末 冷装片
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用解剖针挑取供试品粉末少许，置载玻片的中央，加水、稀甘油、水合氯 醛试液等适宜的试液1滴，用解剖针搅匀(如为酸或碱时应用细玻璃棒代 替解剖针),待液体渗入粉末后，用左手食指与拇指夹持盖玻片的边缘，使 其左侧与药液层左侧接触，再用右手持小镊子或解剖针托住盖玻片的右 侧，缓缓放下，使液体逐渐漫延充满盖玻片下方。如液体未充满盖玻片，
应从空隙相对边缘滴加液体，以防产生气泡；若液体过多，用滤纸片吸去 溢出的液体，最后在载玻片的左端贴上标签或写上标记
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粉末透 化装片
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挑取粉末少许，置载玻片中央偏右处，滴加水合氯醛试液1～2滴，搅
匀，用试管夹夹持载玻片一端，保持水平，置酒精灯火焰上方1～2 cm处
加热，微沸后，离开火焰，再滴加水合氯醛试液，小火继续加热，如此反复
操作至透化清晰。为避免析出水合氯醛结晶，放冷后滴加稀甘油1~2
滴，封片镜检
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混悬 液装片
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制剂中需检查的药味较多或含淀粉粒较多时，可取粉末适量，置试管或 小烧杯中，加入水合氯醛试液并加热透化，用吸管吸取适量混悬液，装片
观察
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2
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解离组织制 片法
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氢氧化 钾法
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薄壁组织发达、 木化组织较少或分 散存在的供试品
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取蜜丸切开后，取适量置试管中， 加5%氢氧化钾溶液适量，加热至用 玻璃棒挤压能离散为止，倾去碱液， 加水洗涤
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取少量供 试品置载玻
片上，用解 剖针撕开， 以稀甘油装 片观察
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硝酸铬法
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木化组织较多或 集成较大群束的供 试品
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取适量供试品置试管中，加硝铬
酸试液适量，放置，至用玻璃棒挤压
能离散为止，倾去酸液，加水洗涤
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氯酸
钾法
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取适量供试品置试管中，加硝酸
溶液(1→2)及氯酸钾少量，缓缓加
热，待产生的气泡逐渐变少时，再及
时加少量氯酸钾，以维持气泡稳定
地产生，至用玻璃棒挤压能离散为
止，倾去酸液，加水洗涤
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表5-3显微鉴别现象表
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细胞内含物及细胞壁
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检 定 观 察
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细 胞 内 含 物
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淀粉粒
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加碘试液，显蓝色或紫色
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用甘油醋酸试液装片，置偏光显微镜下观察，未糊化的淀粉粒显偏光现象； 已糊化的无偏光现象
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糊粉粒
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加碘试液，显棕色或黄棕色
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加硝酸汞试液，显砖红色
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脂肪油、挥发油或树脂
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加苏丹Ⅲ试液，显橘红色、红色或紫红色
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加90%的乙醇，脂肪油和树脂不溶解(蓖麻油和巴豆油例外),挥发油则溶解
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菊糖
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加10%α-萘酚乙醇溶液，再加硫酸，显紫红色并溶解
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黏液
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加钌红试液，显红色
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草酸钙结晶
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加稀醋酸不溶解；加稀盐酸溶解而无气泡产生
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加硫酸溶液(1→2)逐渐溶解，片刻后析出针状硫酸钙结晶
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碳酸钙结晶
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加稀盐酸溶解，同时有气泡产生
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硅质
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加硫酸不溶解
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细 胞 壁
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木质化
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加间苯三酚试液1~2滴，稍放置，加盐酸1滴，显红色或紫红色
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木栓化
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加苏丹Ⅲ试液，稍放置或微热，显橘红色或红色
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纤维素
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加氯化锌碘试液，或先加碘试液湿润后，稍放置，再加硫酸(33→50),显蓝色 或紫色
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硅质化
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加硫酸无变化
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